重组腺病毒载体疫苗（Ad5-LMP2）毒性实验研究
发布时间：2008-09-20 阅读点击：158
【摘要】 目的 考察重组腺病毒疫苗（Ad5- LMP2）的毒性，为该疫苗的临床研究提供数据支持。方法 将Ad5-LMP2转染不同来源的细胞，观察LMP2蛋白的表达情况，同时按照新药临床前毒理研究规范，通过不同的动物实验，在不同剂量下先后进行Ad5-lmp2急性毒性实验和长期毒性实验。结果：Ad5-lmp2能感染Vero、BHK和原代大鼠骨骼肌细胞，并成功表达目的蛋白。急性毒性结果表明最大耐受量>2.04×1013 v.p/kg，相当于有效剂量的204倍；长期毒性实验的高剂量（4.5×1011 v.p./kg）连续给药6次后，恒河猴的外观、一般行为活动、正常生长发育、内脏组织结构等多项指标均无明显的影响，给药组与对照组经统计学比较均无明显差异(P>0.05)。免疫学检查表明Ad5中和抗体和抗LMP2抗体均为阳性，并呈剂量-时间依赖关系，但细胞毒效应并未受到影响。LMP2在各主要脏器中均能被检测到，恢复期结束时可检测到LMP2的脏器相对减少。结论 Ad5-lmp2在体外能感染多种真核细胞并成功表达目的蛋白从而发挥药效作用且在恒河猴的安全剂量大于4.5×1011 v.p./kg，并能够使机体产生免疫反应。
【关键词】 重组腺病毒疫苗 安全性 毒理学研究
近年来，随着生物技术的迅速发展，各种治疗或预防用基因工程药物为治疗人类疾病提供了新的手段。腺病毒载体最初是作为基因治疗的工具被开发出来的，通过缺失或者灭活E1或其它基因区而形成非复制型载体，是目前最理想的载体。Ad5-LMP2是用编码EB病毒膜潜伏蛋白（LMP2抗原）的DNA片断（目的基因），置换来源于5型腺病毒（Ad5）的E1和E3区基因成分，形成复制能力缺失的病毒载体。该载体携带目的基因LMP2进入细胞，表达LMP2蛋白，LMP2抗原被抗原递呈细胞捕获，与MHCⅠ型分子结合，递呈到细胞表面，被CD8＋T细胞识别，激发特异性细胞毒性T细胞反应（CTL）。药效学研究显示该疫苗具有良好的预防和治疗鼻咽癌（NPC）、Burkitt淋巴瘤等的临床效果。
